ABSTRACT
La incubación de la tripanotiona reductasa (TR) de Trypanosoma cruzi con sistemas peroxidasa/H2O2/fenotiazina (FTZ) produjo la inhibición irreversible (inactivación) de TR. El grado de inactivación dependió de: (a) el tiempo de incubación de TR con el sistema peroxidasa/H2O2/FTZ; (b) la naturaleza de la peroxidasa y (c) la estructura de la FTZ. Con las FTZ más activas, la cinética de la inactivación presentó una fase inicial no mayor de 10 minutos, durante la cual TR perdió cerca del 90 por ciento de su actividad. Esa fase fue seguida por otra más lenta, y después de 30 minutos de incubación, TR fue completamente inactiva. Se ensayaron tres peroxidasas, a saber: la peroxidasa de rábano (HRP), la mieloperoxidasa de leucocitos (MPO) y la mioglobina modificada (Mb). En condiciones experimentales comparables, la actividad de las peroxidasas como componentes de los sistemas ensayados decreció en el orden indicado. Con el sistema HRP/H2O2/FTZ, la inactivación final de TR fue de 95-100 por ciento con Tioridazina (TRDZ), Promazina (PZ), Trimeprazina (TMPZ), Proclorpromazina (PCP), Propionilpromazina (PPZ) y Perfenazina (PFZ), todas en concentración 10 µM. Con los sistemas MPO/H2O2/FTZ, las FTZ más activas fueron PZ, TRDZ, TMPZ, PCP y Clorpromazina (CPZ). En iguales condiciones, los sistemas Mb/H2O2/FTZ también inactivaron a TR, utilizando PZ, TMPZ, TRDZ y CPZ. Grupos alquilamino, piperazinilo o piperidilo en la posición 10 (el N) y átomos o grupos -CI, -CF3, -SCH3, COCH2CH3 y -CN en la posición C2 de FTZ afectaron significativamente la actividad de las FTZs. El glutatión (GSH) previno la inactivación de TR por los sistemas HRP/H2O2/PZ y MPO/H2O2/PZ. Los sistemas HRP/H2O2/FTZ y MPO/H2O2/FTZ generaron los radicales catiónicos FTZú+, con estabilidad limitada por su conversión en fenotiazina-sulfoxidos (FTZ-SO), aparentemente inactivos sobre TR. El GSH reaccionó con los radicales catiónicos, regenerando las FTZ originales, lo que concuerda con la protección de TR por GSH frente a los sistemas peroxidasa/H2O2/PZ y, por lo tanto, con la intervención de los radicales catiónicos en la inactivación de TR por los mismos sistemas.